一.儀器

  液相色譜儀；

二.試劑

  混合標準溶液：分別吸取1.0mg/mL土霉素、四環素的0.01mol/L鹽酸溶液各1mL，1.0mg/mL金霉素水溶液2mL，置于10mL容量瓶中，加蒸餾水至刻度。此溶液每毫升含土霉素、四霉素、金霉素各0.1mg，臨時現配。

三.實驗步驟

 （1）色譜條件

  ① 檢測器：紫外檢測器，波長為355nm，靈敏度為0.002AUFS。

  ② 色譜柱：ODS--C₁₈5_μm，6.2mm×15cm。

  ③ 流動相：乙腈/0.01mol/L磷酸二氫鈉溶液（用30%硝酸溶液調節pH至2.5；35:65，體積比）。

  ④ 溫度：柱溫為室溫。

  ⑤ 流速：1mL/min，進樣量為10μL。

 （2）樣品測定   吸取25mL鮮牛乳或其他均漿樣品，置于250mL分液漏斗中，加入75mL乙酸乙酯振蕩1h，或在超聲浴上振搖30min，取出一半乙酸乙酯萃取液（37.5mL），于減壓下蒸干。蒸干后的殘留物分別二次用5mL乙腈溶解，移入30mL分液漏斗，再分別二次用3mL異辛烷萃取，除去乙腈溶解液中的類脂物，將乙腈液濃縮近干，并分別二次用1mL乙酸乙酯把蒸干物轉移到3mL聚四氟乙烯三角瓶內。經氮氣流濃縮，濃縮后用0.2mL氯fang溶解。再加入0.2mL丙二醇-水（50:50，體積比）混合液，用旋轉攪拌器混勻，靜置，zui后用上層醇相進行色譜分析。